產(chǎn)品詳情
簡單介紹：
ATCC CCL-228(SW480)
詳情介紹：
SW480細胞ATCC CCL-228標準細胞株基本信息
| 出品公司: | ATCC |
|---|---|
| 細胞名稱: | ATCC CCL-228細胞, SW480細胞, SW-480細胞, 人結腸腺癌細胞 |
| 種屬來源: | 人 |
| 組織來源: | 結腸 |
| 疾病特征: | Dukes'B型，結腸腺癌 |
| 患者年齡: | 50 |
| 患者性別： | 男 |
| 人種: | 高加索白人 |
| 細胞來源： | SW480是從原發(fā)性結腸腺癌中建立的。 |
| 抗原表達: | HLA A11, B15, B17, Cw1, Cw3; blood type B |
| 癌基因： | myc +; myb + ; ras +; fos +; p53 +; sis -; abl -; ros -; src - |
| 基因表達: | 癌胚抗原（CEA）908 ng/106個細胞/10天。CSAp（CSAp-）和結腸抗原3表達為陰性。 |
| 癌細胞誘導： | 能夠誘導癌細胞產(chǎn)生 |
| 誘導實驗: |
是的，裸鼠，裸鼠皮下接種10的7次方個細胞后，21天內腫瘤以100%的形成（5/5）。
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| 細胞形態(tài): | 上皮樣 |
| 生長特性: | 貼壁生長 |
| 培養(yǎng)基: | L-15培養(yǎng)基，90%；FBS，10%。 |
| 產(chǎn)品目錄號: | CCL-228 |
| 其他保藏庫編號: | ATCC |
| 存儲人: | A Leibovitz |
| 生長條件: | 氣相：空氣；不需要二氧化碳; 溫度：37 ℃, |
| 傳代方法: | 1：2至1：6，每周2次。 |
| 凍存條件: | 90% 完全培養(yǎng)基+10% FBS，液氮儲存 |
| 支原體檢測: | 陰性 |
| **等級: | 1 |
| 應用: |
該細胞系是一種合適的轉染宿主。本品系ras原癌基因第12密碼子突變，可作為PCR檢測該密碼子突變的陽性對照。
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| 核型： | 染色體數(shù)目為亞三倍體，共有11-12條標記染色體。在每一個被檢測的中期中，有8%的人同時觀察到雙著絲粒和雙著絲粒。 |
| 受體表達： | 表達表皮生長因子（EGF） |
| 癌基因表達： | myc +; myb + ; ras +; fos +; sis +; p53 +; abl -; ros -; src - |
| 基因表達： | 癌胚抗原（CEA）0.7 ng／10的6次方細胞/ 10天；角蛋白；轉化生長因子β，Myc+；Myb+；ras+；Fas+；SIS+；ABL-；ROS -；SRC--，HLA-A2，B8，B17；血型A；RH+，免疫酶染色法檢測細胞角蛋白陽性，該線陽性表達c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb，sis和fos癌基因。 |
| 致癌性： | 能夠誘導癌細胞產(chǎn)生，裸鼠皮下接種10的7次方個細胞后，21天內腫瘤以100%的形成（5/5）。 |
| 病毒易感性： | 能夠感染HIV1病毒。 |
| STR: |
Amelogenin: X
CSF1PO: 13,14
D13S317: 12
D16S539: 13
D5S818: 13
D7S820: 8
THO1: 8
TPOX: 11
vWA: 16
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| 同工酶: |
ES-D, 1
G6PD, B
PEP-D, 1
PGD, A
PGM1, 2
PGM3, 1
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| 細胞說明： |
建立SW480細胞系后，從同一病人的淋巴結轉移中獲得的癌細胞系就是見ATCC CCL-227細胞。
CSAp（CSAp-）和結腸抗原3呈陰性。
免疫過氧化物酶染色顯示細胞角蛋白陽性。
p53基因273密碼子中有一個G->突變導致Arg->His替換，309密碼子中有一個C->T突變導致Pro->Ser替換。
細胞表達高水平的p53蛋白。
c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis和fos癌基因表達陽性。
未檢測到N-myc癌基因表達。
基質溶血素，一種與腫瘤侵襲性相關的金屬蛋白酶，不表達。
據(jù)報道，這些細胞能產(chǎn)生GM-CSF。
許多SW480細胞在解凍后的頭幾天保持懸浮狀態(tài)是正常的，并且只是松散地附著在一起。這些細胞在L-15培養(yǎng)基中在大氣條件下培養(yǎng)。如果無法將培養(yǎng)箱專用于大氣培養(yǎng)，則可使用帶擰緊、無排氣塞密封蓋的組織培養(yǎng)瓶，以防止二氧化碳大氣進入培養(yǎng)瓶。用新鮮培養(yǎng)基喂養(yǎng)時，這些細胞應輕拿輕放，任何漂浮的細胞應通過輕輕離心保留，并與粘附細胞一起添加回同一燒瓶中。漂浮細胞*終會附著并生長良好。將懸浮細胞丟失或將細胞分成幾個燒瓶會使培養(yǎng)物稀釋，導致生長緩慢或完全停止。 |
| 參考文獻: |
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| 細胞圖片： |
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SW-480人結腸癌細胞接受后處理
1) 收到細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請 拍照片發(fā)給我們。
2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)，去掉封口 膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml本公司附帶的 完全培養(yǎng)基。
4) 如果細胞密度達80%-90%請及時進行細胞傳代， 傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
5) 接到細胞次日，請檢查細胞是否污染，若發(fā)現(xiàn) 污染或疑似污染，請及時與我們取得聯(lián)系。
SW-480人結腸癌細胞培養(yǎng)操作
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液 加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。**天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清 液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細胞變圓脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加入血 清和 DMSO ，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉入液氮灌儲 存。記錄凍存 管位置以便下次拿取。
SW-480人結腸癌細胞培養(yǎng)注意事項
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細胞因子等，確保細胞培 養(yǎng)條件一致。若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問 題，責任由客戶自行承擔。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量 從瓶壁脫落，將細 胞置于培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng) 4~6 小時,再取出觀察。此時多數(shù)細胞均 會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力，如果證 實細胞活力正常， 請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結果顯示細胞無活力，請拍下 照片及時和我們聯(lián)系，信息確 認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4. 靜置細胞貼壁后，請將細胞瓶內的培養(yǎng)基倒出，留 6~8mL 維持細胞正常培養(yǎng)，待細 胞匯合度 80% 左右時正常傳代。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內多余的培養(yǎng)基可收集備用，細胞 傳代時可以一定比例和客戶 自備的培養(yǎng)基混合，使細胞逐漸適應培養(yǎng)條件。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和 Procell 技術 部溝通交流。由 于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián) 系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問 題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。