免疫組化顯示波形蛋白(Vimentin)抗體陰性；結(jié)蛋白(Desmin)抗體陽性。

1、細(xì)胞培養(yǎng)條件是26°C–28°C，空氣中即可，不用二氧化碳。在培養(yǎng)皿中是半貼壁細(xì)胞，在搖瓶中是懸浮細(xì)胞。

2、S2果蠅細(xì)胞的完全培養(yǎng)基是：
      Schneider's  Drosophila medium + 10% 熱滅活胎牛血清+ 0.1% Pluronic F-68. 這個(gè)完全細(xì)胞培養(yǎng)基在瞬時(shí)表達(dá)和穩(wěn)表達(dá)細(xì)胞系構(gòu)建的時(shí)候，都可以使用。
      Pluronic F-68在懸浮培養(yǎng)的時(shí)候需要加入，但是在貼壁培養(yǎng)的時(shí)候不用添加。
      可以選擇性的加入終濃度為50 單位/ml的青霉素和50 ug/ml的鏈霉素。
      細(xì)胞轉(zhuǎn)染和凍存的時(shí)候，需要確保細(xì)胞的活力大于95%.

3、S2果蠅細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)倍增的時(shí)間是24小時(shí)，細(xì)胞進(jìn)行傳代的時(shí)候*好是在細(xì)胞對(duì)數(shù)生長期。

4、S2果蠅胚胎細(xì)胞的凍存條件是： 45% 用過的完全培養(yǎng)基（條件培養(yǎng)基）+45% 新鮮完全培養(yǎng)基+10% DMSO，液氮儲(chǔ)存。 用過的完全培養(yǎng)基（條件培養(yǎng)基）中含有S2果蠅細(xì)胞的生長因子，有助于S2細(xì)胞的生長，所以一定要保留一點(diǎn)用過的培養(yǎng)基在里面。

5、培養(yǎng)S2細(xì)胞的時(shí)候，如果使用未滅活的胎牛血清，會(huì)抑制S2細(xì)胞的生長。

6、果蠅Schneider 2（s2）細(xì)胞可以轉(zhuǎn)染表達(dá)載體用于蛋白瞬時(shí)表達(dá)或共轉(zhuǎn)染一個(gè)篩選載體（例如pcohygro或pcoblast）構(gòu)建穩(wěn)表達(dá)細(xì)胞系。我們建議你測試一下你的蛋白的瞬時(shí)表達(dá)情況，然后再構(gòu)建穩(wěn)表達(dá)細(xì)胞系。一旦你證明你的蛋白質(zhì)在s2細(xì)胞中表達(dá)，你可以構(gòu)建穩(wěn)表達(dá)細(xì)胞株，增加蛋白表達(dá)，擴(kuò)大蛋白表達(dá)的生產(chǎn)規(guī)模。果蠅S2穩(wěn)表達(dá)細(xì)胞系通常包含多拷貝基因插入，形成500多個(gè)-1000個(gè)拷貝數(shù)，首尾相接，插入的基因拷貝數(shù)可以通過改變表達(dá)質(zhì)粒和選擇質(zhì)粒的比例來控制。我們建議使用表達(dá)質(zhì)粒與選擇質(zhì)粒比例是的19:1（w/w）。你可以改變比率以優(yōu)化特定基因的表達(dá)。質(zhì)粒轉(zhuǎn)染建議使用磷酸鈣，但一些脂基轉(zhuǎn)染試劑，例如Lipo2000轉(zhuǎn)染試劑同樣適用。

7、果蠅表達(dá)系統(tǒng)的篩選載體是pCoHygro載體和pCoBlast載體，他們分別含有潮霉素（Hygromycin）和殺稻瘟菌素（Blasticidin）篩選抗性。在這兩個(gè)載體中，抗性基因都是在Copia啟動(dòng)子的作用下調(diào)控的。

8、構(gòu)建穩(wěn)表達(dá)細(xì)胞系時(shí)，使用pCoHygro篩選質(zhì)粒和表達(dá)質(zhì)粒一起共轉(zhuǎn)染S2果蠅細(xì)胞的時(shí)候，潮霉素的篩選濃度是300ug/ml, 一般要篩選3-4個(gè)星期。使用使用pCoBlast篩選質(zhì)粒和表達(dá)質(zhì)粒一起共轉(zhuǎn)染S2果蠅細(xì)胞構(gòu)建穩(wěn)表達(dá)細(xì)胞系的時(shí)候，殺稻瘟菌素的篩選濃度是25 ug/ml, 一般要篩選2個(gè)星期就可以了。在篩選過程中，細(xì)胞死亡會(huì)經(jīng)常發(fā)生。      


Gibco果蠅s2細(xì)胞用于果蠅表達(dá)系統(tǒng)（DrosophilaM Expression System， DES）中異源蛋白的表達(dá)。S2細(xì)胞系來源于黑腹果蠅（Drosophila melanogaster）胚胎后期細(xì)胞（20-24小時(shí)）的原代培養(yǎng)。s2細(xì)胞系的許多特征表明它來源于巨噬細(xì)胞樣細(xì)胞系。s2細(xì)胞在室溫下二氧化碳濃度條件下就可以生長，在培養(yǎng)皿中呈松散的半粘附單層，在搖瓶中呈懸浮細(xì)胞狀態(tài)。

果蠅S2細(xì)胞特征如下：

 

•可以用于蛋白質(zhì)的瞬時(shí)表達(dá)或用于構(gòu)建穩(wěn)定表達(dá)的細(xì)胞系。

 

•用于蛋白表達(dá)的質(zhì)量和性能測試，用于質(zhì)控。

 

 

1、用于蛋白質(zhì)的瞬時(shí)表達(dá)或構(gòu)建穩(wěn)表達(dá)細(xì)胞系

 

果蠅s2細(xì)胞可單獨(dú)用重組表達(dá)載體進(jìn)行瞬時(shí)表達(dá)研究，或使用載體（如pcohygro或pcoblast）以構(gòu)建穩(wěn)表達(dá)細(xì)胞系。有多種果蠅表達(dá)系統(tǒng)試劑盒可用于在S2細(xì)胞中表達(dá)感興趣的重組蛋白。

 

2、細(xì)胞株質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)

 

每批S2細(xì)胞都經(jīng)過冷凍后細(xì)胞生長和活力測試。此外，還對(duì)S2細(xì)胞株進(jìn)行了細(xì)菌、酵母菌、支原體和病毒污染檢測，并對(duì)其進(jìn)行了同工酶和核型分析。