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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:HeLa細(xì)胞ATCC CCL-2

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 產(chǎn)品廠商:乾思生物
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
HeLa細(xì)胞ATCC CCL-2
詳情介紹:

HeLa細(xì)胞ATCC CCL-2標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞株基本信息

出品公司: ATCC
細(xì)胞名稱: HeLa細(xì)胞, ATCC CCL-2細(xì)胞, HELA細(xì)胞, 人宮頸癌細(xì)胞
細(xì)胞又名: HELA; Hela; He La; He-La; Henrietta Lacks cells; Helacyton gartleri
存儲(chǔ)人: WF Scherer
種屬來源:
組織來源: 子宮
疾病特征: 宮頸腺癌
細(xì)胞形態(tài): 上皮細(xì)胞樣
生長特性: 貼壁生長
培養(yǎng)基: MEM培養(yǎng)基(MEM,GIBCO,貨號(hào)41500034),90%;FBS,10%。
產(chǎn)品目錄號(hào): CCL-2
生長條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%; 溫度:37  ℃, 
傳代方法: 1:2至1:6,每周2次。
凍存條件: 90% 完全培養(yǎng)基+10% DMSO,液氮儲(chǔ)存
支原體檢測: 陰性
**等級(jí): 2
應(yīng)用: 該細(xì)胞可以作為轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞。
STR:
Amelogenin: X
CSF1PO: 9,10
D13S317: 12,13.3
D16S539: 9,10
D5S818: 11,12
D7S820: 8,12
THO1: 7
TPOX: 8,12
vWA: 16,18
同工酶:
G6PD, A
 
備注:
Nucleotide (GenBank) : X98561 H.sapiens mRNA for dsRNA adenosine deaminase, exon 1C.
 
Nucleotide (GenBank) : X98562 H.sapiens mRNA for dsRNA adenosine deaminase, exon 1D.
 
Nucleotide (GenBank) : U89349 Human papillomavirus type 18 variant, partial sequence.
 
Nucleotide (GenBank) : AJ251709 Homo sapiens partial mRNA for putative protein kinase ERK3.
 
Nucleotide (GenBank) : X84958 H.sapiens mRNA for interferon-induced 17kDa membrane protein.
 
Nucleotide (GenBank) : X98559 H.sapiens mRNA for dsRNA adenosine deaminase, constant region.
 
Nucleotide (GenBank) : AJ251708 Homo sapiens partial mRNA for putative microtubule-binding protein.
 
Nucleotide (GenBank) : NM_003641 Homo sapiens interferon induced transmembrane protein 1 (9-27) (IFITM1), mRNA.
 
Nucleotide (GenBank) : NM_022126 Homo sapiens phospholysine phosphohistidine inorganic pyrophosphate phosphatase (LHPP), mRNA.
 
Nucleotide (GenBank) : AB049629 Homo sapiens lhpp mRNA for phospholysine phosphohistidine inorganic pyrophosphate phosphatase, complete cds.
參考文獻(xiàn):
American Public Health Association. Compendium of methods for the microbiological examination of foods. 3rd ed.Washington, DC: American Public Health Association; 1992.
 
AOAC International Invasiveness by Escherichia coli of mammalian cells, microbiological method. Gaithersburg, MD:AOAC International;AOAC "Official Methods of Analysis of the AOAC International" 982.36.
 
Baldi A, et al. Genomic structure of the human retinoblastoma-related Rb2/p130 gene. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93: 4629-4632, 1996. PubMed: 8643454
 
Gey GO, et al. Tissue culture studies of the proliferative capacity of cervical carcinoma and normal epithelium. Cancer Res. 12: 264-265, 1952.
 
Chen TR. Re-evaluation of HeLa, HeLa S3, and HEp-2 karyotypes. Cytogenet. Cell Genet. 48: 19-24, 1988. PubMed: 3180844
 
細(xì)胞圖片:
HeLa細(xì)胞圖片


HeLa細(xì)胞ATCC CCL-2人宮頸癌細(xì)胞特點(diǎn)和簡介

HeLa是**個(gè)來自人體組織經(jīng)連續(xù)培養(yǎng)獲得的非整倍體上皮樣細(xì)胞系,它由Gey GO等在1951年從31歲女性黑人的宮頸癌組織建立。經(jīng)原始組織切片重新觀察,Jones等將其診斷為腺癌。已知該細(xì)胞系含有人**狀瘤病毒HPV18序列,需在2級(jí)生物**防護(hù)臺(tái)操作。該細(xì)胞角蛋白陽性,p53表達(dá)量較低,但表達(dá)正常水平的pRB(視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤抑制因子)。

HeLa細(xì)胞ATCC CCL-2人宮頸癌細(xì)胞接受后處理

1) 收到細(xì)胞后,請(qǐng)檢查是否漏液 ,如果漏液,請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。

 2) 請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長 狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。

 3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加 6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。

 4) 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%請(qǐng)及 時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng) 基。

 5) 接到細(xì)胞次日,請(qǐng)檢查細(xì)胞是 否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉寐?lián) 系。
 

HeLa細(xì)胞ATCC CCL-2人宮頸癌細(xì)胞培養(yǎng)操作

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基 混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有 細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜) 。**天換液并 檢查細(xì)胞密度。

 2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。      
   
     1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。

     2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作 臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。  
   
     3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

     4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;

    1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細(xì)胞變圓 脫 落后 ,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。

    2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清 和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液 ,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。

    3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記 錄凍存管位置以便下次拿取。

HeLa細(xì)胞ATCC CCL-2人宮頸癌細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)

 1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn) 象發(fā)生 請(qǐng)及 時(shí)和我們聯(lián)系。
 
 2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細(xì)胞 因子 等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致。若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問 題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān) 。

 3.   用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會(huì)有少 量 從瓶 壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時(shí),再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均 會(huì)貼壁,若 細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán) 染色測定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常, 請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng) 基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活 力,請(qǐng)拍下 照片及時(shí)和我們聯(lián)系,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟?再免費(fèi)寄送一次。

 4.   靜置細(xì)胞貼壁后,請(qǐng)將細(xì)胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基倒出,留 6~8mL 維持細(xì)胞正常培養(yǎng),待細(xì) 胞匯 合度  80%左右時(shí)正常傳代。

 5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞 傳代時(shí) 可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。

 6.   建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和 Procell 技術(shù) 部 溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián) 系,告知 細(xì)胞的具體情況,以便我們 的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

 7.該細(xì)胞僅供科研使用。


HeLa細(xì)胞ATCC CCL-2標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞株說明書pdf版和相關(guān)資料下載

HeLa細(xì)胞ATCC CCL-2標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞株應(yīng)用舉例

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