出品公司:	ATCC
細(xì)胞名稱(chēng):	Kasumi-1細(xì)胞, ATCC CRL-2724細(xì)胞, Kasumi1細(xì)胞, 人急性粒細(xì)胞白血病細(xì)胞
細(xì)胞又名:	KASUMI-1; Kasumi 1; KASUMI1; Kasumi1
存儲(chǔ)人:	H Asou
種屬來(lái)源:	人
組織來(lái)源:	外周血
疾病特征:	急性粒細(xì)胞白血病
細(xì)胞形態(tài):	原粒細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:	懸浮生長(zhǎng)
培養(yǎng)基:	RPMI-1640，90%；FBS，10%。
產(chǎn)品目錄號(hào):	CRL-2724
生長(zhǎng)條件:	氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%; 溫度：37 ℃,
傳代方法:	1：2至1：6，每周2次。
凍存條件:	90% 完全培養(yǎng)基+10% DMSO，液氮儲(chǔ)存
支原體檢測(cè):	陰性
**等級(jí):	1
STR:	D5S818: 9,11 D13S317: 11,13 D7S820: 8,11 D16S539: 9,12 vWA: 14 THO1: 6,9 Amelogenin: X TPOX: 8,9 CSF1PO: 10,12
參考文獻(xiàn):	Tashiro S, et al. Establishment of a human acute myeloid leukemia cell line (Kasumi-1) with 8;21 chromosome translocation. Blood 77: 2031-2036, 1991. PubMed: 2018839   Miyoshi H, et al. The t(8;21) translocation in acute myeloid leukemia results in production of an AML1-MTG8 fusion transcript. EMBO J. 12: 2715-2721, 1993. PubMed: 8334990   Miyoshi H, et al. t(8;21) breakpoints on chromosome 21 in acute myeloid leukemia are clustered within a limited region of a single gene, AML1. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88: 10431-10434, 1991. PubMed: 1720541   Asou H, et al. 19-nor vitamin-D analogs: a new class of potent inhibitors of proliferation and inducers of differentiation of human myeloid leukemia cell lines. Blood 92: 2441-2449, 1998. PubMed: 9746784
細(xì)胞圖片：

Kasumi-1細(xì)胞ATCC CRL-2724人急性粒細(xì)胞白血病細(xì)胞特點(diǎn)和簡(jiǎn)介

這是一個(gè)帶有8：21號(hào)染色體轉(zhuǎn)位的白血病細(xì)胞株。 這個(gè)轉(zhuǎn)位使得AML1基因和ETO (或稱(chēng) MTG8)基因串聯(lián)，使融合基因AML1-ETO (也稱(chēng)作 AML1-MTG或 RUNX1-CBF2T1)的表達(dá)升高，因而細(xì)胞產(chǎn)生嵌合的AML1-ETO蛋白。 這個(gè)蛋白下調(diào)CEBPA mRNA，蛋白和DNA的結(jié)合活性，而這種結(jié)合對(duì)粒性白細(xì)胞的分化是極端重要的。 這株細(xì)胞建立于一位急性白血病患者的外周血。 這株細(xì)胞髓過(guò)氧化物酶陽(yáng)性，顯示其髓性成熟的形態(tài)。 增生試驗(yàn)顯示，培養(yǎng)的細(xì)胞對(duì)IL-3、IL-6、G-CSF（粒細(xì)胞集落刺激因子）、GM-CS（粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子）有響應(yīng)，但對(duì)IL-1和IL-5沒(méi)有響應(yīng)。在體外液體培養(yǎng)中分別加入二甲亞砜、G-CSF、IL-5，也沒(méi)有觀察到粒性或嗜酸性細(xì)胞的成熟。 加入佛波酯可以看到誘導(dǎo)出的巨噬細(xì)胞樣細(xì)胞。 1,25S-(OH)2-16,23-diene-26-F3-10-nor D3抑制其增生。

Kasumi-1細(xì)胞ATCC CRL-2724人急性粒細(xì)胞白血病細(xì)胞接受后處理

1) 收到細(xì)胞后，請(qǐng)檢查是否漏液 ，如果漏液，請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。

 2) 請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng) 狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。

 3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加 6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。

 4) 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%請(qǐng)及 時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。

 5) 接到細(xì)胞次日，請(qǐng)檢查細(xì)胞是 否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉寐?lián)系。
 

Kasumi-1細(xì)胞ATCC CRL-2724人急性粒細(xì)胞白血病細(xì)胞培養(yǎng)操作

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。**天換液并 檢查細(xì)胞密度。

 2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。      
   
     1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。

     2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。  
   
     3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

     4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類(lèi)；

    1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。

    2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。

    3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

Kasumi-1細(xì)胞ATCC CRL-2724人急性粒細(xì)胞白血病細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)

 1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請(qǐng)及 時(shí)和我們聯(lián)系。
 
 2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細(xì)胞因子 等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致。若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn) 題，責(zé)任由客戶(hù)自行承擔(dān)。

 3.   用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量 從瓶 壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時(shí),再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均 會(huì)貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán) 染色測(cè)定細(xì)胞活力，如果證實(shí)細(xì)胞活力正常， 請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無(wú)活 力，請(qǐng)拍下 照片及時(shí)和我們聯(lián)系，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。

 4.   靜置細(xì)胞貼壁后，請(qǐng)將細(xì)胞瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基倒出，留 6~8mL 維持細(xì)胞正常培養(yǎng)，待細(xì) 胞匯 合度  80%左右時(shí)正常傳代。

 5. 請(qǐng)客戶(hù)用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細(xì)胞 傳代時(shí)可以 一定比例和客戶(hù)自備的培養(yǎng)基混合，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。

 6.   建議客戶(hù)收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和 Procell 技術(shù) 部 溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián) 系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們 的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。

 7.該細(xì)胞僅供科研使用。