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產(chǎn)品詳情
簡單介紹:
ATCC HTB-52(SK-HEP-1)
詳情介紹:
SK-HEP-1細(xì)胞ATCC HTB-52標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞株基本信息
出品公司: | ATCC |
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細(xì)胞名稱: | SK-HEP-1細(xì)胞, ATCC HTB-52細(xì)胞, SKHEP1細(xì)胞, 人肝癌細(xì)胞 |
細(xì)胞又名: | SK-Hep-1; SK HEP-1; SK HEP 01; SK-Hep1; Sk-Hep1; SK Hep1; SKHEP-1; SKHEP1; SKHep1; SK_HEP1 |
存儲人: | G Trempe, LJ Old, 1971 |
種屬來源: | 人 |
組織來源: | 肝臟 |
疾病特征: | 肝癌,肝腹水 |
細(xì)胞形態(tài): | 上皮細(xì)胞樣 |
生長特性: | 貼壁生長 |
培養(yǎng)基: | MEM培養(yǎng)基(MEM,GIBCO,貨號41500034),90%;FBS,10%。 |
產(chǎn)品目錄號: | HTB-52 |
生長條件: | 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%; 溫度:37 ℃, |
傳代方法: | 1:2至1:6,每周2次。 |
凍存條件: | 90% 完全培養(yǎng)基+10% DMSO,液氮儲存 |
支原體檢測: | 陰性 |
**等級: | 1 |
應(yīng)用: | 該細(xì)胞可以作為轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞。 |
核型: | 該細(xì)胞為非整倍體細(xì)胞,染色體是亞三倍體。染色體N1, N13, N14, N15, 和N16與正常染色體相比數(shù)目不足。在細(xì)胞分裂中期,染色體N7,N12和N17與數(shù)目多于正常染色體數(shù)目。該細(xì)胞有8個代表性標(biāo)記 del(1)(q21), der(1)t(1;2)(p36;q21), ?tdic(1;12)(p36;q24), ampl.t(4pter--->4q11::HSR::4q12--->4q24::HSR?::4q26--->4q35::2q15--->2pter), 13p+, 13p++, 14p+, t(14q15q), iso(14q), 19q+, del(3)(p14p24), 15p+. |
STR: |
Amelogenin: X
CSF1PO: 11,12
D13S317: 8,12
D16S539: 12
D5S818: 10,13
D7S820: 8,11
THO1: 7,9
TPOX: 9
vWA: 14,17
|
同工酶: |
AK-1, 1
ES-D, 1
G6PD, B
GLO-I, 1
Me-2, 1-2
PGM1, 2
PGM3, 1
|
備注: |
Nucleotide (GenBank) : S40179 pancreatic cholesterol esterase homolog {exon 10} [human, SK-Hep-I cells, ATCC HTB 52, Genomic, 84 nt]. |
參考文獻(xiàn): |
Fogh J. Human tumor cells in vitro. New York: Plenum Press; 1975.
Fogh J, et al. Absence of HeLa cell contamination in 169 cell lines derived from human tumors. J. Natl. Cancer Inst. 58: 209-214, 1977. PubMed: 833871
Goodfellow M, et al. One hundred and twenty-seven cultured human tumor cell lines producing tumors in nude mice. J. Natl. Cancer Inst. 59: 221-226, 1977. PubMed: 77210034
Fogh J. Cultivation, characterization, and identification of human tumor cells with emphasis on kidney, testis, and bladder tumors. Natl. Cancer Inst. Monogr. 49: 5-9, 1978. PubMed: 571047
Heffelfinger SC, et al. SK HEP-1: a human cell line of endothelial origin. In Vitro Cell. Dev. Biol. 28A: 136-148, 1992. PubMed: 1371504
Gucev ZS, et al. Evidence for insulin-like growth factor (IGF)-independent transcriptional regulation of IGF binding protein-3 by growth hormone in SKHEP-1 human hepatocarcinoma cells. Endocrinology 138: 1464-1470, 1997. PubMed: 9075703
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細(xì)胞圖片: |
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SK-HEP-1細(xì)胞ATCC HTB-52人肝癌細(xì)胞特點和簡介
SK-HEP-1細(xì)胞系已被鑒定為內(nèi)皮來源。 該細(xì)胞系為異倍體女性人(XX),染色體在亞三倍體范圍內(nèi)。 在裸鼠中,它能形成與肝癌相一致的大細(xì)胞癌。 在本庫通過支原體檢測。 在本庫通過STR檢測。
SK-HEP-1細(xì)胞ATCC HTB-52人肝癌細(xì)胞接受后處理
1) 收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液 ,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2) 請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長 狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加 6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
4) 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%請及 時進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
5) 接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是 否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。
SK-HEP-1細(xì)胞ATCC HTB-52人肝癌細(xì)胞培養(yǎng)操作
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。**天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
SK-HEP-1細(xì)胞ATCC HTB-52人肝癌細(xì)胞培養(yǎng)注意事項
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請及 時和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細(xì)胞因子 等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致。若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問 題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細(xì)胞會有少量 從瓶 壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時,再取出觀察。此時多數(shù)細(xì)胞均 會貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán) 染色測定細(xì)胞活力,如果證實細(xì)胞活力正常, 請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活 力,請拍下 照片及時和我們聯(lián)系,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4. 靜置細(xì)胞貼壁后,請將細(xì)胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基倒出,留 6~8mL 維持細(xì)胞正常培養(yǎng),待細(xì) 胞匯 合度 80%左右時正常傳代。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞 傳代時可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和 Procell 技術(shù) 部 溝通交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián) 系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們 的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。