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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:ATCC CCL-136(RD)

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 產(chǎn)品廠商:乾思生物
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡(jiǎn)單介紹:
ATCC CCL-136(RD)
詳情介紹:

RD細(xì)胞ATCC CCL-136標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞株基本信息

出品公司: ATCC
細(xì)胞名稱: RD細(xì)胞, ATCC CCL-136細(xì)胞, 人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞
細(xì)胞又名: R D; RD-2; RD 2; 130T; 130-T; 130 T; TE-32; TE 32; TE32; TE 32.T; Te 32.T
存儲(chǔ)人: RM McAllister
種屬來源:
組織來源: 肌肉
疾病特征: 橫紋肌肉瘤
細(xì)胞形態(tài): 紡錘形細(xì)胞和大的多核細(xì)胞
生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)
培養(yǎng)基: MEM培養(yǎng)基(MEM,GIBCO,貨號(hào)12800017),90%;FBS,10%。
產(chǎn)品目錄號(hào): CCL-136
生長(zhǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%; 溫度:37 ℃, 
傳代方法: 1:2至1:6,每周2次。
凍存條件: 90% 完全培養(yǎng)基+10% DMSO,液氮儲(chǔ)存
支原體檢測(cè): 陰性
**等級(jí): 1
應(yīng)用: 該細(xì)胞系可用于病毒的檢測(cè)。
STR:
Amelogenin: X
CSF1PO: 10,11
D13S317: 13
D16S539: 10,11
D5S818: 11
D7S820: 8,12
THO1: 9.3
TPOX: 9
vWA: 18
同工酶: G6PD, B
備注:
Nucleotide (GenBank) : U09279 Human type XIX collagen (COL19A1) mRNA, partial cds.
參考文獻(xiàn):
American Public Health Association. Compendium of methods for the microbiological examination of foods. 3RD細(xì)胞ATCC CCL-136 ed.Washington, DC: American Public Health Association; 1992.
 
McAllister RM, et al. Cultivation in vitro of cells derived from a human rhabdomyosarcoma. Cancer 24: 520-526, 1969. PubMed: 4241949
 
Chen TR, et al. Cell identity resolved. Nature 340: 106, 1989. PubMed: 2739733
 
Stratton MR, et al. Misidentified cell. Nature 337: 311-312, 1989. PubMed: 2911385
 
Gershwin ME, et al. Immunobiology of heterotransplanted human tumors in nude mice. J. Natl. Cancer Inst. 58: 1455-1463, 1977. PubMed: 857033
 
Hahon N, Cooke KO. Primary virus-cell interactions in the immunofluorescence ***** of Venezuelan equine encephalomyelitis virus. J. Virol. 1: 326, 1967. PubMed: 4918236
 
Guerin E, et al. Stromelysin-3 induction and interstitial collagenase repression by retinoic acid. J. Biol. Chem. 272: 11088-11095, 1997. PubMed: 9111003
 
Jeffers M, et al. Degradation of the Met tyrosine kinase receptor by the ubiquitin-proteasome pathway. Mol. Cell. Biol. 17: 799-808, 1997. PubMed: 9001234
 
細(xì)胞圖片:
RD細(xì)胞圖片


RD細(xì)胞ATCC CCL-136人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞特點(diǎn)和簡(jiǎn)介

目前顯示,這株細(xì)胞如果跟TE671不一樣,至少也是它的親本。 在本庫通過支原體檢測(cè)。 在本庫通過STR檢測(cè)。可產(chǎn)生肌紅蛋白和肌球蛋白ATPase,可用作病毒檢測(cè)。
 

RD細(xì)胞ATCC CCL-136人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞接受后處理

1)  收到細(xì)胞后,請(qǐng)檢查是否漏液 ,如果漏液,請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
 
2)  請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng) 狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
 
3)  棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加 6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
 
4)  如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%請(qǐng)及 時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
 
5)  接到細(xì)胞次日,請(qǐng)檢查細(xì)胞是 否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉寐?lián)系。
 

RD細(xì)胞ATCC CCL-136人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞培養(yǎng)操作

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。**天換液并 檢查細(xì)胞密度。
 
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
 
     1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
 
     2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
     
     3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
 
     4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
 
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
 
      1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
 
      2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
 
     3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌 儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

RD細(xì)胞ATCC CCL-136人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請(qǐng)及 時(shí)和我們聯(lián)系。
 
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細(xì)胞因子 等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致。若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問 題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
 
3.   用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量 從瓶 壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時(shí),再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均 會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán) 染色測(cè)定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常, 請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活 力,請(qǐng)拍下 照片及時(shí)和我們聯(lián)系,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
 
4.   靜置細(xì)胞貼壁后,請(qǐng)將細(xì)胞瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基倒出,留 6~8mL 維持細(xì)胞正常培養(yǎng),待細(xì) 胞匯 合度  80%左右時(shí)正常傳代。
 
5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞 傳代時(shí)可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
 
6.   建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和 Procell 技術(shù) 部 溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián) 系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們 的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
 
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。



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RD細(xì)胞ATCC CCL-136標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞株應(yīng)用舉例

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