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產(chǎn)品詳情
簡(jiǎn)單介紹：
ATCC CCL-10(BHK-21)
詳情介紹：
BHK-21細(xì)胞ATCC CCL-10標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞株基本信息
| 出品公司: | ATCC |
|---|---|
| 細(xì)胞名稱(chēng): | BHK-21細(xì)胞, ATCC CCL-10細(xì)胞, BHK21細(xì)胞, 倉(cāng)鼠腎成纖維細(xì)胞 |
| 細(xì)胞又名: | BHK 21 clone 13; BHK21 clone 13; BHK-21 (clone 13); BHK 21 (clone 13); BHK21 (clone-13); BHK-21 (C-13); BHK-21 [C-13]; BHK-21(C-13); BHK-21(C13); BHK-21 C-13; BHK-21-C13; BHK-21/C13; BHK 21 CL13; BHK 21 C13; BHK21-C13; BHK-21 C 13; BHK 21/13; BHK21/C13; BHK21/13; BHK21 C13; BHK21C13; C13; BHK-21-ATCC |
| 存儲(chǔ)人: | I Macpherson |
| 種屬來(lái)源: | 倉(cāng)鼠 |
| 組織來(lái)源: | 正常腎 |
| 細(xì)胞形態(tài): | 成纖維細(xì)胞 |
| 生長(zhǎng)特性: | 貼壁生長(zhǎng) |
| 培養(yǎng)基: | MEM培養(yǎng)基(MEM，GIBCO，貨號(hào)41500034)，90%；FBS，10%。 |
| 產(chǎn)品目錄號(hào): | CCL-10 |
| 生長(zhǎng)條件: | 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%; 溫度：37 ℃, |
| 傳代方法: | 1：2至1：6，每周2次。 |
| 凍存條件: | 90% 完全培養(yǎng)基+10% DMSO，液氮儲(chǔ)存 |
| 支原體檢測(cè): | 陰性 |
| **等級(jí): | 1 |
| 應(yīng)用: |
世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）使用這些細(xì)胞對(duì)狂犬病的常規(guī)診斷。 該細(xì)胞系已被用來(lái)作為一個(gè)含有可選擇和可擴(kuò)增標(biāo)記DNAs表達(dá)載體轉(zhuǎn)化的宿主。 |
| 參考文獻(xiàn): |
Drayna D, et al. Genetic mapping and diagnosis of haemophilia A achieved through a BclI polymorphism in the factor VIII gene. Nature 314: 738-740, 1985. PubMed: 2986011
Kazazian HH Jr., et al. Restriction site polymorphism in the phosphoglycerate kinase gene on the X chromosome. Hum. Genet. 66: 217-219, 1984. PubMed: 6325324
Macpherson I, Stoker M. Polyoma transformation of hamster cell clones--an investigation of genetic factors affecting cell competence. Virology 16: 147-151, 1962. PubMed: 14468055
Macpherson, et al. Polyoma transformation of hamster cell clones - an investigation of genetic factors affecting cell competence. Virology 14: 359-370, 1961.
Macpherson I. Characteristics of a hamster cell clone transformed by polyoma virus. J. Natl. Cancer Inst. 30: 795-815, 1963.
Deleersnyder V, et al. Formation of native hepatitis C virus glycoprotein complexes. J. Virol. 71: 697-704, 1997. PubMed: 8985401
Yang TT, et al. Quantification of gene expression with a secreted alkaline phosphatase reporter system. BioTechniques 23: 1110-1114, 1997. PubMed: 9421645
Hussain MA, et al. POU domain transcription factor brain 4 confers pancreatic alpha-cell-specific expression of the proglucagon gene through interaction with a novel proximal promoter G1 element. Mol. Cell. Biol. 17: 7186-7194, 1997. PubMed: 9372951
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| 細(xì)胞圖片： |
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BHK-21細(xì)胞ATCC CCL-10倉(cāng)鼠腎成纖維細(xì)胞特點(diǎn)和簡(jiǎn)介
1961年3月，I.A. Macpherson和M.G.P. Stoker從1日齡的倉(cāng)鼠建立了BHK-21細(xì)胞ATCC CCL-10 (C-13)的親本。隨后84天連續(xù)培養(yǎng)，僅中斷8天進(jìn)行凍存，通過(guò)單細(xì)胞分離建立了13號(hào)克隆。這株細(xì)胞可用作轉(zhuǎn)染宿主，用于表達(dá)包含選擇及擴(kuò)增標(biāo)記的DNA(如Factor VIII,見(jiàn)ATCC CRL-8544)的載體。 在本庫(kù)通過(guò)支原體檢測(cè)。
BHK-21細(xì)胞ATCC CCL-10倉(cāng)鼠腎成纖維細(xì)胞接受后處理
1) 收到細(xì)胞后，請(qǐng)檢查是否漏液 ，如果漏液，請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
2) 請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng) 狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加 6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
4) 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%請(qǐng)及 時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
5) 接到細(xì)胞次日，請(qǐng)檢查細(xì)胞是 否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉寐?lián)系。
BHK-21細(xì)胞ATCC CCL-10倉(cāng)鼠腎成纖維細(xì)胞培養(yǎng)操作
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。**天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類(lèi)；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌 儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
BHK-21細(xì)胞ATCC CCL-10倉(cāng)鼠腎成纖維細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)
1. 收到細(xì)胞后首先觀(guān)察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請(qǐng)及 時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細(xì)胞因子 等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致。若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn) 題，責(zé)任由客戶(hù)自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量 從瓶 壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時(shí),再取出觀(guān)察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均 會(huì)貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán) 染色測(cè)定細(xì)胞活力，如果證實(shí)細(xì)胞活力正常， 請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無(wú)活 力，請(qǐng)拍下 照片及時(shí)和我們聯(lián)系，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 靜置細(xì)胞貼壁后，請(qǐng)將細(xì)胞瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基倒出，留 6~8mL 維持細(xì)胞正常培養(yǎng)，待細(xì) 胞匯 合度 80%左右時(shí)正常傳代。
5. 請(qǐng)客戶(hù)用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細(xì)胞 傳代時(shí)可以 一定比例和客戶(hù)自備的培養(yǎng)基混合，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
6. 建議客戶(hù)收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和 Procell 技術(shù) 部 溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián) 系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們 的技術(shù)人員跟蹤回訪(fǎng)直至問(wèn)題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。