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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:ATCC CRL-1740(LNCaP clone FGC)

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 產(chǎn)品廠商:乾思生物
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡(jiǎn)單介紹:
ATCC CRL-1740(LNCaP clone FGC)
詳情介紹:

LNCaP clone FGC細(xì)胞ATCC CRL-1740標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞株基本信息

出品公司: ATCC
細(xì)胞名稱: LNCaP clone FGC細(xì)胞, ATCC CRL-1740細(xì)胞, LNCaPFGC細(xì)胞, 人前列腺癌細(xì)胞
細(xì)胞又名: LNCaP-Clone-FGC; LNCaP.FGC; LNCaP-FGC; LNCaP FGC; LNCaP-ATCC
存儲(chǔ)人: JS Horoszewicz
種屬來(lái)源:
組織來(lái)源: 前列腺
疾病特征: 左鎖骨淋巴結(jié)癌轉(zhuǎn)移灶
細(xì)胞形態(tài): 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性: 貼壁不牢
培養(yǎng)基: RPMI-1640(GIBCO,貨號(hào)31800022),90%;FBS,10%。
產(chǎn)品目錄號(hào): CRL-1740
生長(zhǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%; 溫度:37  ℃, 
傳代方法: 1:2至1:6,每周2次。
凍存條件: 90% 完全培養(yǎng)基+10% DMSO,液氮儲(chǔ)存
支原體檢測(cè): 陰性
**等級(jí): 1
應(yīng)用: 該細(xì)胞可以作為轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞。
STR:
Amelogenin: X,Y
CSF1PO: 10,11
D13S317: 10,12
D16S539: 11
D5S818: 11,12
D7S820: 9.1,10.3
THO1: 9
TPOX: 8,9
vWA: 16,18
參考文獻(xiàn):
Models for prostate cancer. 37New York: Liss; 1980.
 
Gibas Z, et al. A high-resolution study of chromosome changes in a human prostatic carcinoma cell line (LNCaP). Cancer Genet. Cytogenet. 11: 399-404, 1984. PubMed: 6584201
 
Horoszewicz JS, et al. LNCaP model of human prostatic carcinoma. Cancer Res. 43: 1809-1818, 1983. PubMed: 6831420
 
Hu SX, et al. Development of an adenovirus vector with tetracycline-regulatable human tumor necrosis factor alpha gene expression. Cancer Res. 57: 3339-3343, 1997. PubMed: 9269991
 
Boffa LC, et al. Invasion of the CAG triplet repeats by a complementary peptide nucleic acid inhibits transcription of the androgen receptor and TATA-binding protein genes and correlates with refolding of an active nucleosome containing a unique AR gene sequence. J. Biol. Chem. 271: 13228-13233, 1996. PubMed: 8662737
 
細(xì)胞圖片:
LNCaP clone FGC細(xì)胞圖片


LNCaP clone FGC細(xì)胞ATCC CRL-1740人前列腺癌細(xì)胞特點(diǎn)和簡(jiǎn)介

人前列腺癌細(xì)胞LNCaP克隆FGC是從一位50歲白人男性(血型B+)的左鎖骨淋巴結(jié)針刺活檢中分離,該患者經(jīng)確診為前列腺癌轉(zhuǎn)移。 這株細(xì)胞對(duì)5-α-二氫睪酮(生長(zhǎng)調(diào)節(jié)子和酸性磷酸脂酶產(chǎn)物)有響應(yīng)。 這株細(xì)胞并不形成一致的單層,而是形成集落,在傳代時(shí)可以用滴管反復(fù)吹吸打碎。 它們僅僅輕輕地吸附在基底上,不形成匯合,很快使培養(yǎng)基變酸。 生長(zhǎng)很慢。 傳代后48小時(shí)內(nèi)不應(yīng)擾動(dòng)。 當(dāng)培養(yǎng)瓶封包后,多數(shù)細(xì)胞從培養(yǎng)瓶底分離,懸浮在培養(yǎng)基中。 收到后,在通常培養(yǎng)單層細(xì)胞的條件下培養(yǎng)24到48小時(shí),以使細(xì)胞再貼壁。 此后可以換上新鮮培養(yǎng)液。 如果需要,培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)容物可以收集,300g離心15分鐘,以10毫升培養(yǎng)液重懸并培養(yǎng)到一個(gè)單獨(dú)的培養(yǎng)瓶中。請(qǐng)使用Corning的Cellbind培養(yǎng)瓶培養(yǎng)。 在本庫(kù)通過(guò)支原體檢測(cè)。 在本庫(kù)通過(guò)STR檢測(cè)。

LNCaP clone FGC細(xì)胞ATCC CRL-1740人前列腺癌細(xì)胞接受后處理

1) 收到細(xì)胞后,請(qǐng)檢查是否漏液 ,如果漏液,請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
  2) 請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng) 狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
  3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加 6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
  4) 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%請(qǐng)及 時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng) 基。
  5) 接到細(xì)胞次日,請(qǐng)檢查細(xì)胞是 否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉寐?lián) 系。
 

LNCaP clone FGC細(xì)胞ATCC CRL-1740人前列腺癌細(xì)胞培養(yǎng)操作

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然 后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng) 過(guò)夜)。**天換液并 檢查細(xì)胞密度。
  2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。        1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
       2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶 中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落 ,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。      
     3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
       4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中 或者瓶中。
  3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
        1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
        2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞, 根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍 存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
       3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí) 以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

LNCaP clone FGC細(xì)胞ATCC CRL-1740人前列腺癌細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述 現(xiàn) 象發(fā)生請(qǐng)及 時(shí)和我們聯(lián)系。
  2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、 所 需細(xì)胞因子 等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致。若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn) 題,責(zé)任由客戶 自行承擔(dān)。
  3.   用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題貼壁細(xì) 胞會(huì)有少量 從瓶 壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時(shí),再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均 會(huì)貼 壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán) 染色測(cè)定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常, 請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮 培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無(wú)活 力,請(qǐng)拍下 照片及時(shí)和我們聯(lián)系,信息確認(rèn)后我們?yōu)?您再免費(fèi)寄送一次。
  4.   靜置細(xì)胞貼壁后,請(qǐng)將細(xì)胞瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基倒出,留 6~8mL 維持細(xì)胞正常培 養(yǎng),待細(xì) 胞匯 合度  80%左右時(shí)正常傳代。
  5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì) 胞 傳代時(shí)可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
  6.   建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和 Procell 技術(shù) 部 溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián) 系 ,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們 的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。
  7.該細(xì)胞僅供科研使用。


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LNCaP clone FGC細(xì)胞ATCC CRL-1740標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞株應(yīng)用舉例

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