出品公司:	ATCC
細胞名稱:	KU812細胞, ATCC CRL-2099細胞, 人外周血嗜堿性白血病細胞
細胞又名:	KU812; KU-812; KU.812; KU 812
存儲人:	K Kishi
種屬來源:	人
組織來源:	外周血
疾病特征:	慢性髓性白血病
細胞形態(tài):	骨髓母細胞
生長特性:	懸浮生長
培養(yǎng)基:	IMDM培養(yǎng)基(GIBCO,貨號12200036)，90%；FBS，10%。
產(chǎn)品目錄號:	CRL-2099
生長條件:	氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%; 溫度：37  ℃,
傳代方法:	1：2至1：6，每周2次。
凍存條件:	90% 完全培養(yǎng)基+10% DMSO，液氮儲存
支原體檢測:	陰性
**等級:	1
參考文獻:	Kishi K. A new leukemia cell line with Philadelphia chromosome characterized as basophil precursors. Leuk. Res. 9: 381-390, 1985. PubMed: 3858609   Okano H, et al. Hemoglobin synthesis of both ***** and fetal types in a human CML cell line. J. Biochem. 104: 162-164, 1988. PubMed: 2460439   Okamura S, et al. Expression of cytokine genes in hematological malignancies. Nippon Ketsueki Gakkai Zasshi 52: 1423-1432, 1989. PubMed: 2698048   The KU812 cell line was established from the peripheral blood of a patient in blast crisis of chronic myelogenous leukemia. The cells contain at least one Ph1 (Philadelphia) chromosome. The cell line has some characteristics of basophilic leukocytes (Fc receptors, basophilic granules, histamine production), and are negative for lymphoid markers.   Blom T, et al. Phenotypic characterization of KU812, a cell line identified as an immature human basophilic leukocyte. Eur. J. Immunol. 22: 2025-2032, 1992. PubMed: 1639103
細胞圖片：

KU812細胞ATCC CRL-2099人外周血嗜堿性白血病細胞特點和簡介

從一位慢性髓性白血病患者暴發(fā)期的外周血建立了KU812細胞株。 這些細胞至少有一個Ph1(費城)染色體。 這株細胞有一些嗜堿性細胞的標記(如Fc 受體，堿性顆粒，生成組胺)，而淋巴標記陰性。 在本庫通過支原體檢測。 在本庫通過STR檢測。

KU812細胞ATCC CRL-2099人外周血嗜堿性白血病細胞接受后處理

1) 收到細胞后，請檢查是否漏液 ，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。
  2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長 狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
  3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加 6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
  4) 如果細胞密度達80%-90%請及 時進行細胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng) 基。
  5) 接到細胞次日，請檢查細胞是 否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請及時與我們?nèi)〉寐?lián) 系。
 

KU812細胞ATCC CRL-2099人外周血嗜堿性白血病細胞培養(yǎng)操作

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然 后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng) 過夜）。**天換液并 檢查細胞密度。
  2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。        1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
       2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶 中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落 ，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。      
     3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
       4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中 或者瓶中。
  3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
        1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
        2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞， 根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍 存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
       3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時 以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

KU812細胞ATCC CRL-2099人外周血嗜堿性白血病細胞培養(yǎng)注意事項

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述 現(xiàn) 象發(fā)生請及 時和我們聯(lián)系。
  2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、 所 需細胞因子 等，確保細胞培養(yǎng)條件一致。若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問 題，責任由客戶 自行承擔。
  3.   用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細 胞會有少量 從瓶 壁脫落，將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時,再取出觀察。此時多數(shù)細胞均 會貼 壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍 染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常， 請將細胞離心后用新鮮 培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細胞無活 力，請拍下 照片及時和我們聯(lián)系，信息確認后我們?yōu)?您再免費寄送一次。
  4.   靜置細胞貼壁后，請將細胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基倒出，留 6~8mL 維持細胞正常培 養(yǎng)，待細 胞匯 合度  80%左右時正常傳代。
  5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細 胞 傳代時可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細胞逐漸適應培養(yǎng)條件。
  6.   建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和 Procell 技術 部 溝通交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián) 系 ，告知細胞的具體情況，以便我們 的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
  7.該細胞僅供科研使用。