出品公司:	ATCC
細胞名稱:	RBL-2H3細胞, ATCC CRL-2256細胞, RBL2H3細胞, 大鼠嗜堿性細胞白血病細胞
細胞又名:	RBL2H3; RBL 2H3; RBL.2H3
存儲人:	RP Siraganian
種屬來源:	大鼠
組織來源:	外周血
疾病特征:	化學誘變嗜堿性細胞；白血病
細胞形態(tài):	成纖維細胞
生長特性:	貼壁生長
培養(yǎng)基:	MEM培養(yǎng)基(GIBCO,貨號41500034)，90%；FBS（滅火），15%。
產(chǎn)品目錄號:	CRL-2256
生長條件:	氣相：空氣，85%；二氧化碳，5%; 溫度：37  ℃,
傳代方法:	1：2至1：6，每周2次。
凍存條件:	90% 完全培養(yǎng)基+10% DMSO，液氮儲存
支原體檢測:	陰性
**等級:	1
應(yīng)用:	該細胞系是一個合適的轉(zhuǎn)染宿主。 他們已被廣泛用于在細胞包括細胞內(nèi)鈣離子的變化作用分泌不同方面的研究，磷脂酶的激活蛋白激酶和小G蛋白。 他們已被廣泛用于研究FcERI和肥大細胞分泌的生化途徑。
參考文獻:	Kulczycki A Jr., et al. The interaction of IgE with rat basophilic leukemia cells. I. Evidence for specific binding of IgE. J. Exp. Med. 139: 600-616, 1974. PubMed: 4812630   Barsumian EL, et al. IgE-induced histamine release from rat basophilic leukemia cell lines: isolation of releasing and nonreleasing clones. Eur. J. Immunol. 11: 317-323, 1981. PubMed: 6166481   Eccleston E, et al. Basophilic leukaemia in the albino rat and a demonstration of the basopoietin. Nat. New Biol. 244: 73-76, 1973.
細胞圖片：

RBL-2H3細胞ATCC CRL-2256大鼠嗜堿性細胞白血病細胞特點和簡介

RBL-2H3是1978年國立牙科研究所的免疫學實驗室從Wistar大鼠保持腫瘤狀態(tài)的嗜堿性細胞中分離和克隆出來的嗜堿性白血病細胞株。 這些細胞具有高親和力的IgE受體。 通過集聚這些受體或與鈣離子載體協(xié)同作用可以激活它們分泌組胺及其他遞質(zhì)。 這株細胞廣泛地用于研究肥大細胞FcERI和分泌的生化途徑。 RBL-2H3細胞是研究FcERI結(jié)構(gòu)的模型。 它們廣泛地用于研究細胞分泌的不同方面，包括細胞內(nèi)鈣濃度改變、磷酸脂酶激活、蛋白激酶和小G蛋白的作用。 雖然幾乎所有批號的FBS都支持細胞的生長，但在某些批號中FcERI集聚后脫?；酶谩?另一株大鼠嗜堿性細胞株(RBL，ATCC CRL-1378)不會脫?；?。 在本庫通過支原體檢測。

RBL-2H3細胞ATCC CRL-2256大鼠嗜堿性細胞白血病細胞接受后處理

1) 收到細胞后，請檢查是否漏液 ，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。
  2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長 狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
  3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加 6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
  4) 如果細胞密度達80%-90%請及 時進行細胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng) 基。
  5) 接到細胞次日，請檢查細胞是 否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請及時與我們?nèi)〉寐?lián) 系。
 

RBL-2H3細胞ATCC CRL-2256大鼠嗜堿性細胞白血病細胞培養(yǎng)操作

1）復(fù)蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然 后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng) 過夜）。**天換液并 檢查細胞密度。
  2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。        1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
       2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶 中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落 ，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。      
     3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
       4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中 或者瓶中。
  3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
        1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
        2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞， 根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍 存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
       3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時 以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

RBL-2H3細胞ATCC CRL-2256大鼠嗜堿性細胞白血病細胞培養(yǎng)注意事項

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述 現(xiàn) 象發(fā)生請及 時和我們聯(lián)系。
  2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、 所 需細胞因子 等，確保細胞培養(yǎng)條件一致。若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問 題，責任由客戶 自行承擔。
  3.   用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細 胞會有少量 從瓶 壁脫落，將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時,再取出觀察。此時多數(shù)細胞均 會貼 壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍 染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常， 請將細胞離心后用新鮮 培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細胞無活 力，請拍下 照片及時和我們聯(lián)系，信息確認后我們?yōu)?您再免費寄送一次。
  4.   靜置細胞貼壁后，請將細胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基倒出，留 6~8mL 維持細胞正常培 養(yǎng)，待細 胞匯 合度  80%左右時正常傳代。
  5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細 胞 傳代時可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
  6.   建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和 Procell 技術(shù) 部 溝通交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián) 系 ，告知細胞的具體情況，以便我們 的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
  7.該細胞僅供科研使用。