出品公司:	ATCC
細胞名稱:	MRC-5細胞, ATCC CCL-171細胞, MRC5細胞, 人胚肺細胞
細胞又名:	MRC5; MRC 5; MRCV; MRC-V; Medical Research Council cell strain-5
存儲人:	JP Jacobs
種屬來源:	人
組織來源:	肺
疾病特征:	正常
細胞形態(tài):	成纖維細胞樣
生長特性:	貼壁生長
培養(yǎng)基:	MEM培養(yǎng)基(MEM，GIBCO，貨號41500034)，90%；FBS，10%。
產品目錄號:	CCL-171
生長條件:	氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%; 溫度：37  ℃,
傳代方法:	1：2至1：6，每周2次。
凍存條件:	90% 完全培養(yǎng)基+10% DMSO，液氮儲存
支原體檢測:	陰性
**等級:	1
應用:	該細胞可以作為轉染宿主細胞，藥效試驗。
STR:	Amelogenin: X,Y CSF1PO: 11,12 D13S317: 11,14 D16S539: 9,11 D5S818: 11,12 D7S820: 10,11 THO1: 8 TPOX: 8 vWA: 15
同工酶:	G6PD, B
參考文獻:	Jacobs JP, et al. Characteristics of a human diploid cell designated MRC-5. Nature 227: 168-170, 1970. PubMed: 4316953   . Proc. Symp. Human Diploid Cells. Zagreb, Yugoslavia: Yugoslav Acad. Sci. Arts; 1970.   Holliday R, Tarrant GM. Altered enzymes in ageing human fibroblasts. Nature 238: 26-30, 1972. PubMed: 12635262   Lewis CM, Tarrant GM. Error theory and ageing in human diploid fibroblasts. Nature 239: 316-318, 1972. PubMed: 12635218   Landers JE, et al. Translational enhancement of mdm2 oncogene expression in human tumor cells containing a stabilized wild-type p53 protein. Cancer Res. 57: 3562-3568, 1997. PubMed: 9270029   Kaur A, et al. Cytotoxic T-lymphocyte responses to cytomegalovirus in normal and simian immunodeficiency virus-infected Rhesus macaques. J. Virol. 70: 7725-7733, 1996. PubMed: 8892893
細胞圖片：

MRC-5細胞ATCC CCL-171人胚肺細胞特點和簡介

MRC-5細胞系來自14周齡男性胎兒的正常肺組織，該細胞老化前能傳代42到46次群體倍增。 它是正常二倍體細胞系，46，XY核型。 模式染色體數為46，概率為70%。 在本庫通過支原體檢測。 在本庫通過STR檢測。

MRC-5細胞ATCC CCL-171人胚肺細胞接受后處理

1) 收到細胞后，請檢查是否漏液 ，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。

 2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長 狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。

 3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加 6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。

 4) 如果細胞密度達80%-90%請及 時進行細胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng) 基。

 5) 接到細胞次日，請檢查細胞是 否污染，若發(fā)現污染或疑似污染，請及時與我們取得聯系 。
 

MRC-5細胞ATCC CCL-171人胚肺細胞培養(yǎng)操作

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基 混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有 細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。 **天換液并 檢查細胞密度。

 2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。      
   
     1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

     2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作 臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。  
   
     3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

     4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

    1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細胞變圓 脫 落后， 加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數板計數。

    2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注 意凍 存管做好標識。

    3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記 錄凍存管位置以便下次拿取。

MRC-5細胞ATCC CCL-171人胚肺細胞培養(yǎng)注意事項

 1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現 象發(fā)生 請及 時和我們聯系。
 
 2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細胞 因子 等，確保細胞培養(yǎng)條件一致。若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現問 題，責任由客戶自行承擔 。

 3.   用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量 從瓶 壁脫落，將細胞置于培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng) 4~6 小時,再取出觀察。此時多數細胞均 會貼壁，若細胞 仍不能貼壁請用臺盼藍 染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常， 請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再 次貼壁培養(yǎng)；如果染色結果顯示細胞無活 力，請拍下 照片及時和我們聯系，信息確認后我們?yōu)槟倜?費寄送一次。

 4.   靜置細胞貼壁后，請將細胞瓶內的培養(yǎng)基倒出，留 6~8mL 維持細胞正常培養(yǎng)，待細 胞匯 合度  80%左右時正常傳代。

 5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內多余的培養(yǎng)基可收集備用，細胞 傳代時 可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細胞逐漸適應培養(yǎng)條件。

 6.   建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和 Procell 技 術 部 溝通交流。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯 系，告知細胞 的具體情況，以便我們 的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

 7.該細胞僅供科研使用。