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產(chǎn)品詳情
簡(jiǎn)單介紹:
BL21-AI
詳情介紹:
BL21(AI) BL21AI感受態(tài)細(xì)胞基本信息
出品公司: | Invitrogen |
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感受態(tài)細(xì)胞名稱: | BL21-AI, BL21(AI), BL21 AI, BL21AI |
菌株類型: | E.coli |
產(chǎn)品目錄號(hào): | C6070-03 |
培養(yǎng)基: | LB培養(yǎng)基 |
生長(zhǎng)條件: | 37 ℃, 有氧 |
基因型: |
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抗性: | 四環(huán)素 |
質(zhì)粒轉(zhuǎn)化條件: | 42 ℃熱激 |
應(yīng)用: | 蛋白表達(dá), 毒性蛋白表達(dá) |
誘導(dǎo)方法: | L-阿拉伯糖 |
菌株特點(diǎn): |
來(lái)源于BL21菌株。 是大腸桿菌B/r型菌株(E.coli B/r),在araBAD操縱子的araB位點(diǎn)含有T7 RNA聚合酶基因,T7 RNA聚合酶基因的表達(dá)可以通過(guò)阿拉伯糖或者葡萄糖來(lái)調(diào)節(jié),但菌株不含有l(wèi)on蛋白酶。 菌株的*大蛋白表達(dá)量往往低于BL21(DE3). BL21-AI是膜外蛋白酶OMPT的缺陷型菌株。該酶的缺失能夠有效防止表達(dá)的異源目的蛋白在細(xì)菌體內(nèi)的降解。 Brian Caliendo (Voigt 實(shí)驗(yàn)室)報(bào)道過(guò)pCP20質(zhì)粒比較難于轉(zhuǎn)化到這個(gè)感受態(tài)細(xì)胞中,而pCP20轉(zhuǎn)化到其他菌株中都很正常,但是菌體原因未知。 使用L-阿拉伯糖誘導(dǎo)araBAD啟動(dòng)子下游的蛋白表達(dá)。使用葡萄糖可以抑制araBAD啟動(dòng)子下游的蛋白表達(dá)。注意:即使不加葡萄糖,BL21AI細(xì)胞的araBAD啟動(dòng)子下游的本底蛋白表達(dá)水平仍然很低,加入葡萄糖后能夠進(jìn)一步的降低本底蛋白的表達(dá)水平。 BL21-AI感受態(tài)細(xì)胞適用于任何以T7啟動(dòng)子為基礎(chǔ)的表達(dá)載體,能夠進(jìn)行高水平的重組蛋白表達(dá)。 因?yàn)榫牦w內(nèi)的T7 RNA聚合酶水平能夠進(jìn)行有效調(diào)節(jié),BL21-AI感受態(tài)細(xì)胞能夠有效表達(dá)對(duì)其他BL21細(xì)胞有毒或生長(zhǎng)抑制的蛋白。從BL21-AI菌株中獲得目的重組蛋白產(chǎn)量,和其他BL21菌株產(chǎn)量相當(dāng)。 建議選擇該菌株進(jìn)行蛋白表達(dá)的條件如下:1. 你 在使用T7啟動(dòng)子載體(高拷貝或者低拷貝都可以)進(jìn)行蛋白表達(dá)。2.使用其他BL21進(jìn)行蛋白表達(dá)時(shí),你觀察到明顯的細(xì)菌生長(zhǎng)的抑制作用。3.你在表達(dá)一個(gè)已知的毒性蛋白。 |