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產(chǎn)品詳情
簡(jiǎn)單介紹:
C41(DE3)pLysS
詳情介紹:
感受態(tài)細(xì)胞基本信息
出品公司: | Lucigen |
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感受態(tài)細(xì)胞名稱: | C41(DE3)pLysS |
菌株類型: | E.coli |
產(chǎn)品目錄號(hào): | 60444-1/ 60444-2 |
培養(yǎng)基: | LB培養(yǎng)基 |
生長(zhǎng)條件: | 37 ℃, 有氧 |
基因型: | |
抗性: | 氯霉素 |
質(zhì)粒轉(zhuǎn)化條件: | 42 ℃熱激 |
應(yīng)用: | 蛋白表達(dá) |
誘導(dǎo)方法: | IPTG |
菌株特點(diǎn): |
過(guò)表達(dá)C41(DE3), C41(DE3) pLysS, C43(DE3), and C43(DE3) pLysS感受態(tài)細(xì)胞宿主菌能夠有效表達(dá)來(lái)源于各個(gè)物種包括細(xì)菌,酵母,植物,病毒和動(dòng)物等多個(gè)物種的有毒蛋白。
該系列宿主菌基因中含有突變,可以包容有毒蛋白的表達(dá)。C41(DE3)來(lái)源于BL21(DE3)。該宿主菌含有一個(gè)基因突變,能夠降低T7 RNAP的酶活力,所以能夠阻止過(guò)表達(dá)重組表達(dá)有毒蛋白的細(xì)胞死亡。
正如標(biāo)準(zhǔn)的BL21(DE3)菌株,過(guò)表達(dá)菌株C41(DE3), C41(DE3)pLysS, C43(DE3), 和C43(DE3)pLysS是λDE3的溶源性菌株。這些菌株在lacUV5啟動(dòng)子的下游含有一個(gè)T7 RNA聚合酶基因。這些宿主菌適合于表達(dá)克隆于T7啟動(dòng)子表達(dá)載體上的基因。過(guò)表達(dá)菌株C41(DE3), C41(DE3)pLysS, C43(DE3), 和C43(DE3)pLysS在lon和ompT蛋白酶的缺陷上是不同的。
過(guò)表達(dá)的C41(DE3)和C43(DE3)pLysS攜帶有一個(gè)氯霉素抗性質(zhì)粒,該質(zhì)粒能夠表達(dá)少量的T7溶菌酶。這個(gè)酶是T7RNA聚合酶的天然抑制劑。這些宿主菌能夠有效抑制T7RNA聚合酶在誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)前的表達(dá)水平,所以能夠穩(wěn)定菌株去編碼特定的獨(dú)立蛋白。在培養(yǎng)細(xì)菌的過(guò)程中,應(yīng)該加入34 µg/mL的氯霉素來(lái)維持pLysS質(zhì)粒的存在。
請(qǐng)注意的是,該過(guò)表達(dá)系列宿主菌的蛋白表達(dá)量與BL21(DE3)相比要稍低。
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